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纸片扩散法药敏试验质量控制遇到问题解决指南
2007-11-16 13:09:07  作者:佚名  来源:CLSI  浏览次数:36  文字大小:【】【】【

8 质量控制遇到问题解决指南

抗微生物药

QC菌株

现象

可能原因

解释/解决办法

氨基糖苷类

任何菌株

抑菌环直径太小

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

氨基糖苷类

任何菌株

抑菌环直径太大

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

氨基糖苷类

铜绿假单胞菌ATCC27853

抑菌环直径太小

培养基中Ca2+/Mg2+含量过高

使用新批号培养基。

氨基糖苷类

铜绿假单胞菌ATCC27853

抑菌环直径太大

Ca2+/Mg2+含量过低

使用新批号培养基。

阿莫西林/克拉维酸

大肠埃希菌ATCC35218

抑菌环直径太小

克拉维酸不稳定;纸片失效

使用新批号纸片,检查贮藏条件和包装完整性。

氨苄西林

大肠埃希菌ATCC35218

抑菌环直径太大(应无抑菌环耐药)

编码β-内酰胺酶的质粒自发性丢失

见注释(1QC菌株的保存。

β-内酰胺类

任何菌株

抑菌环直径最初在允许范围,但随着时间的过去会减小和失控

纸片失效

使用新批号纸片。检查贮藏条件和包装完整性。亚胺培南、克拉维酸和头孢克罗特别不稳定。

氨曲南、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢他啶、头孢曲松

肺炎克雷伯菌ATCC700603

抑菌环直径太大

编码β-内酰胺酶的质粒自发性丢失

见注释(1QC菌株的保存

头孢噻肟/克拉维酸

头孢他啶/克拉维酸

肺炎克雷伯菌ATCC700603

ESBL确证试验阴性

编码β-内酰胺酶的质粒自发性丢失

见注释(1QC菌株的保存。

青霉素

任何菌株

抑菌环直径太大

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

青霉素

任何菌株

抑菌环直径太小

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

羧苄西林

铜绿假单胞菌ATCC27853

抑菌环直径太小

重复传代导致QC耐药

见注释(1QC菌株的保存。

替卡西林/克拉维酸

大肠埃希菌ATCC35218

抑菌环直径太小

克拉维酸不稳定,纸片失效

使用新批号纸片。检查贮藏条件和包装完整性。

克林霉素

金黄色葡萄球菌ATCC25923

抑菌环直径太小

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

克林霉素

金黄色葡萄球菌ATCC25923

抑菌环直径太大

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

达托霉素

金黄色葡萄球菌ATCC25923

抑菌环直径太小

培养基中Ca2+含量太低

使用新批号培养基。

大环内酯类

金黄色葡萄球菌ATCC25923

抑菌环直径太小

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

大环内酯类

金黄色葡萄球菌ATCC25923

抑菌环直径太大

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

喹诺酮类

任何菌株

抑菌环直径太小

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

喹诺酮类

任何菌株

抑菌环直径太大

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

四环素类

任何菌株

抑菌环直径太大

培养基pH过低

pH范围:7.2-7.4,避免CO2孵育降低pH

四环素类

任何菌株

抑菌环直径太小

培养基pH过高

pH范围:7.2-7.4

四环素类

任何菌株

抑菌环直径太小

培养基中Ca2+/Mg2+含量过高

使用新批号培养基。

四环素类

任何菌株

抑菌环直径太大

培养基中Ca2+/Mg2+含量过低

使用新批号培养基。

磺胺类

甲氧苄啶

甲氧苄啶/磺胺甲噁唑

粪肠球菌ATCC29212

抑菌环直径≤20mm

培养基中胸腺嘧啶脱氧核苷含量过高

使用新批号培养基。

不同药物

任何菌株

多数抑菌环直径太大

接种物浓度太低,接种物制备错误,培养基厚度太薄,M-H琼脂营养不合要求

重配0.5麦氏标准浊度或标准化设备。若使用硫酸钡和胶乳标准品应检查失效期并适当储存。琼脂厚度约4mm。使用新批号M-H琼脂。

不同药物

任何菌株

多数抑菌环直径太小

接种物浓度太高,接种物制备错误,培养基厚度太厚,M-H琼脂营养不合要求

重配0.5麦氏标准浊度或标准化设备。若使用硫酸钡和胶乳标准品应检查失效期并适当储存。琼脂厚度约4mm。使用新批号M-H琼脂。

不同药物

任何菌株

一个或多个抑菌环直径太小或太大

测量错误,抄写错误,随机的有缺陷纸片,纸片没紧压在琼脂上

核对读数以免测量或抄写错误。重新试验。其试验的结果仍失控并且没有发现错误,则开始纠正行动。

不同药物

肺炎链球菌ATCC49619

抑菌环直径太大,生长不充足

制备接种物的菌龄太老,含有许多死细胞,应使用培养18-20h的细菌制备接种物

传代QC菌株,重复QC试验或重新转种新QC菌株。

不同药物

任何菌株

对同一种抗菌药物,有一株菌失控,另一株菌在控

提示有一株QC菌株可能出现QC问题

重新试验有问题菌株。用已知MIC替代菌株进行评价。对出现问题的QC菌株/抗菌药物组合进行纠正。

不同药物

任何菌株

对同一种抗菌药物,2株菌均失控

提示纸片有问题

使用新批号纸片,检查贮存条件和包装完整性。

不同药物

任何菌株

抑菌环重叠

每个平板上贴的纸片太多

在一个150mm平板上不要超过12张纸片,100mm平板上不超过5张纸片,产生大抑菌环的苛养菌用的纸片更少。

初次使用M-H琼脂进行抗菌药物敏感性试验,本表提供了质量控制失控时解决问题和校正指南。有关其他信息参见M2-A9,纸片扩散法,第15节,质量控制程序和附录A,质量控制方案流程图。失控时首先应重复试验,若问题不能解决,应遵循表中建议,若仍不能解决,应告知生产厂家以便解决潜在的产品质量问题。

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